楊永花

(蘭州市園林科學研究所730070)

垂吊矮牽牛(Petunia?Spreding)為茄科矮牽牛屬的多年生蔓生植物，是近年來較為時尚的垂吊型花卉裝飾植物。現在該品系重要依賴從外洋引進F1代種子舉行播種繁殖，但種子價格昂貴(單價2.5元/粒)，細小，播種難度大，種子繁殖又易發生變異，出現雜色，而扦插繁殖苗分枝力弱，株型單薄，嚴重影響其觀賞價值。播種、扦插都難以在短時間內生產出批量的優質種苗。因此，采取組織培育技術舉行快速繁殖，可解決繁殖系數低、種子價格昂貴等問題，從而滿足市場的大量要求。

一、材料與方式

1?取材與消毒
在日光溫室中選擇生長結實、無病蟲害植株的幼嫩葉片，作為外植體材料，用自來水沖洗清潔，再用蒸餾水沖洗2～3次，置于超凈工作臺上，先用70%的酒精浸泡10秒鐘，無菌水沖洗一次，再用1‰的升汞消毒5～6分鐘，無菌水沖洗4～5次，待接種。
2?培育基及培育條件(培育基單位mg/L)
試驗所選用的培育基為(1)MS+6BA1+NAA0.1；(2)MS+6BA2+NAA0.2；(3)MS+6BA0.5+NAA0.1；(4)MS+KT0.5+NAA0.1；(5)1/2MS；(6)1/2MS+IBA0.1；(7)1/2MS+IBA0.2；(8)1/2MS+NAA0.03。以上培育基中均加入瓊脂3.3g/L，MS中加入白糖30g/L，1/2MS中加入白糖20g/L，pH值均為5.8，培育溫度(25±2)℃，光照強度1500LX～2000LX，光照時間10～12h/d。
3?實驗方式
將葉片剪成1cm2大小的方塊，接種在培育基(1)和(2)中，誘導愈傷組織及不定芽的形成。每處理10塊葉片，待外植體萌發發生麋集的不定芽叢后，支解成1cm2大小的方塊，繼代培育在(3)和(4)中，每處理接20塊不定芽叢。培育10天后統計高于2cm的結實幼苗，并將高于2cm的結實幼苗剪切下來轉接到(5)～(8)中舉行生根，每處理接40棵幼苗，培育一周后統計幼苗生根情形。當生根試苗根系生長至1cm以上，苗高4～5cm時舉行移栽。

二、試驗效果

1?芽誘導分化
接種到培育基(2)中的葉片，培育1周后，葉片邊緣開始出現淡綠色愈傷組織，葉片漸變厚并彎曲成拱形狀，2周后愈傷組織上出現綠色突起(即芽點)，3周開始分化，發生麋集的叢生芽，誘導率達100%。接種到培育基(1)中的葉片培育10天后，葉片邊緣開始出現淺綠色愈傷組織，葉片加厚，并膨大凸起。3周后愈傷組織上出現希罕的綠色芽點，1個月后開始分化發生叢生芽，誘導率達90%。葉片在培育基(2)中比(1)中分化所需時間短，分化率高，且發生麋集的叢生芽。因此，MS+6BA2+NAA0.2更適宜葉片誘導培育。
2?芽的增殖繼代
繼代于(3)中的葉片不定芽叢培育10天后，每塊不定芽可增殖15～20個高于2cm的幼苗，但幼苗莖桿細弱，需經過壯苗培育才能轉接到生根培育基中舉行生根。繼代于(4)中的不定芽叢培育10天后，每塊不定芽均可增殖30～40個高于2cm的幼苗，且幼苗莖桿粗壯，葉片濃綠，生長勢強，可直接轉接到生根培育基中舉行生根。因此，MS+KT0.5+NAA0.1是叢生芽增殖的較佳繼代培育基。
3?生根培育
結實幼苗在生根培育基(5)和(6)中，培育5天后開始生根，培育10天后，(5)中幼苗根細弱，每株均勻有12條根，部門幼苗葉尖變白，(6)中幼苗根粗壯，均勻有20條根，幼苗生長興旺，(7)中幼苗7天開始生根，根粗短，均勻只有9條根，(8)中幼苗8天開始生根，根粗短，均勻有16條根，幼苗生長結實。因此，從開始生根天數、均勻根數及幼苗生長勢看，1/2MS+IBA0.1為幼苗較佳生根培育基，根多而粗壯。

三、煉苗與移栽
生根苗根系長至1cm以上，株高4～5cm時即可舉行煉苗移栽。移栽前先在自然條件下打開瓶口煉苗2～3天，輕取試管苗，用溫水洗清潔根部粘附的培育基，移栽到新的蛭石基質中，用1‰的多菌靈溶液澆濕基質，用75%的遮蔭網遮蔭保濕，1周后逐漸透風透光，生長適溫控制在22℃左右。

四、小結與討論
1?通過組織培育技術可快速生產出垂吊矮牽牛幼苗，解決了其種子依賴入口等問題，降低了生產成本，為大規模商業化生產種苗提供了一條捷徑。生產的植株分植習性好，葉片濃綠，花色鮮艷，花期長。
2?在實驗范圍內，垂吊矮牽牛葉片誘導愈傷組織形成叢生芽的較佳培育基為MS+6BA2+NAA0.2，較佳增殖繼代培育基為MS+KT0.5+NAA0.1，較佳生根培育基為1/2MS+IBA0.1。
3?生根試管苗根系長至1cm以上，株高4～5cm時即可煉苗移植，移栽成活率達95%以上。