從國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局獲悉，由中國林科院林業(yè)所、林木遺傳育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室王軍輝研究員課題組主持完成的“粗枝云杉體細(xì)胞胚胎發(fā)生與植株再生方式”得到國家發(fā)現(xiàn)專利授權(quán)。
粗枝云杉(Picea asperata. Mast)即國內(nèi)俗稱的云杉，我國特有種、也是國內(nèi)分布較廣的云杉屬樹種、木料性子優(yōu)良、是其重要分布區(qū)川西高原、甘肅南部和山西西南部的重要造林樹種和建群種。體細(xì)胞胚胎發(fā)生技術(shù)作為一種針葉樹種較具潛力的無性繁殖技術(shù)，現(xiàn)在，在粗枝云杉繁殖方面尚屬空缺。
該發(fā)現(xiàn)以粗枝云杉未成熟合子胚為誘導(dǎo)質(zhì)料，成立了粗枝云杉體細(xì)胞胚胎發(fā)生和植株再生歷程中的全套技術(shù)系統(tǒng)：(1)未成熟合子胚在每年的6月中旬到7月上旬較有利于胚性愈傷組織的誘導(dǎo)，采取1/2 LM基本培育基，胚性愈傷組織誘導(dǎo)率均勻到達(dá)64.22%，較高到達(dá)93.33%，該誘導(dǎo)頻率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國內(nèi)同類樹種報(bào)道的均勻30%左右的程度。(2)通過對影響胚性愈傷組織增殖條件的篩選，劃分成立粗枝云杉胚性愈傷組織的半固體和液體懸浮增殖系統(tǒng)；增殖2周后，胚性愈傷組織增殖量劃分增添1.2倍和4.5倍，不僅極大提高了胚性愈傷組織的增殖效率，還保證了愈傷組織的高度均一性，為隨后體細(xì)胞胚的高同步化分化奠基了基礎(chǔ)。(3)采取正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)相結(jié)合的方式，確定了粗枝云杉體細(xì)胞胚穩(wěn)定、高誘導(dǎo)頻率和高同步化的分化配方；均勻每克鮮重的胚性愈傷組織可以分化發(fā)生發(fā)育完整的體細(xì)胞胚100個(gè)以上，較高到達(dá)500個(gè)以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高出國內(nèi)同類研究中的均勻?yàn)?0個(gè)左右的報(bào)道。(4)成立了粗枝云杉體細(xì)胞胚高萌發(fā)頻率方案；采取1/4 LM基本培育基，萌發(fā)率均勻到達(dá)50%左右，基本滿足了體胚萌發(fā)的需要，結(jié)合適當(dāng)?shù)母苫幚砑夹g(shù)，萌發(fā)率到達(dá)80%以上。
該研究成果歷時(shí)三年，不僅得到了“粗枝云杉體細(xì)胞胚胎發(fā)生與植株再生方式”全套穩(wěn)定的技術(shù)系統(tǒng)，還得到了一大批高胚性誘導(dǎo)能力的細(xì)胞系，為后續(xù)開展以粗枝云杉為代表的云杉屬樹種的基礎(chǔ)研究提供了大量珍貴質(zhì)料。該研究獲國家“十二五”科技支持設(shè)計(jì)課題“北目的葉樹種高世代育種技術(shù)研究與樹模”的資助。(中國林科院)